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（1）冰凍切片厚度 6～10µm，不固定或 10%福爾馬林固定 10min后水洗
（2）切片加入60%的異丙醇內浸洗 2min
（3）用冰蒸餾水稍微清洗一遍（說明書沒說明要洗）
（4）切片加入改良油紅 O 染色液中，密閉染色 10～15min，該過程注意避光
（5）用冰蒸餾水清洗一遍（說明書沒說明要洗）
（6）加入 60%的異丙醇內稍洗以去除染液（大約幾秒）
（7）加入冰蒸餾水中稍微清洗一遍
（8）Mayer 蘇mu素染色液復染核 5min
（9）用冰蒸餾水清洗一遍
（10）片子用濾紙吸干水分
（11）用甘油明膠或阿拉伯糖膠封片。
1. 石蠟切片不能用于油紅O染色，原因在于石蠟包埋過程中需要脫水，脫水過程中需要乙醇-二甲苯和石蠟，二甲苯是有機溶劑，會把中性脂肪溶解；
2. 冰凍切片準備時，包埋的降溫過程建議選擇干冰，原因在于若選擇液氮降溫過程較強烈，可能導致組織內部炸裂，而干冰降溫的過程比較緩和，染出來的片子比較好看；
3. 切片的厚度要稍微厚一些，建議選擇8-10μm；
4. 實驗設計建議設計陰性對照和陽性對照，如陽性對照可以用脂質豐富的肝臟組織等，陰性對照可以根據文獻來選擇無脂肪沉積的組織。
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